高壓細胞破碎儀如何進行細胞破碎
高壓細胞破碎儀采用電機驅(qū)動,而非氣動方式,這避免了空氣經(jīng)壓縮產(chǎn)生的水份進入高壓泵或均質(zhì)閥腔體,污染細胞破碎的樣品,而導(dǎo)致高壓細胞破碎儀無法正常運行。高壓細胞破碎儀對酵母細胞、大腸桿菌破碎,一次破碎,細胞破碎率可以達到90%以上,2次或2次以上破碎,細胞破碎率可以達到大約100%,且細胞破碎后釋放的蛋白活性好。高壓細胞破碎儀是由高壓泵和均質(zhì)腔組成,由電機驅(qū)動泵體的柱賽泵做往復(fù)運動進而在均質(zhì)閥體內(nèi)生產(chǎn)壓力。細胞懸浮液在柱塞作用下通過進出口止回閥進入到可調(diào)節(jié)壓力下的閥組中,受到非常高的壓力擠壓。細胞懸浮液在高壓的作用下經(jīng)Y型結(jié)構(gòu)的均質(zhì)通道,從閥座與閥桿之間的環(huán)隙高速噴出,使瞬間失壓的物流以極高的流速進行對撞。高速噴出的細胞懸浮液又射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向從出口管流出。在高壓細胞破碎儀中,高壓時的壓力可達幾百個大氣壓,細胞懸浮液高速噴出時,速度可達每秒幾百米。細胞在這一系列高速運動過程中,由于突然減壓和高速沖擊,使細胞受到高的液相剪切力、碰撞,在均質(zhì)閥內(nèi)產(chǎn)生剪切效應(yīng)、對撞效應(yīng)、空穴效應(yīng)等三種效應(yīng),從而造成細胞破碎。在操作方式上,可以采用單次通過勻漿器或多次循環(huán)通過等方式,也可連續(xù)操作。
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