應(yīng)用背景
微藻的活性物質(zhì)存在于細(xì)胞內(nèi),這些物質(zhì)的提取過(guò)程通常需要先對(duì)微藻進(jìn)行細(xì)胞破壁。與一般微生物細(xì)胞壁相比,微藻細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密,破壁難度大,同時(shí)還要保證各種生化產(chǎn)物在破壁過(guò)程中的生物活性不被破壞,因此細(xì)胞破壁成為各種藻類產(chǎn)物提取的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。適用于微藻細(xì)胞破壁方法的微藻來(lái)自于淡水微藻、咸水或海水環(huán)境中,能夠產(chǎn)生生物活性物質(zhì)的經(jīng)濟(jì)微藻,包括扁藻、小球藻、柵藻、紅球藻、紫球藻、雪藻或硅藻。
應(yīng)用難點(diǎn)
如果目標(biāo)產(chǎn)物是小分子生物活性物質(zhì),比如蝦青素、葉黃素等,分子結(jié)構(gòu)中存在不少共軛不飽和碳碳雙鍵,易氧化,對(duì)光熱敏感,破壁工藝的選擇尤其要考慮目標(biāo)產(chǎn)物的活性。微藻細(xì)胞破壁傳統(tǒng)的方法有機(jī)械粉碎、凍融、超聲波、膠體磨等物理方法和生物酶解方法等,這些方法存在明顯的缺陷,或用時(shí)較長(zhǎng)、或溫度較高、或粉碎效果不佳、或沒(méi)有有效保護(hù)生物活性成分。盡管微藻存在很多優(yōu)勢(shì),但傳統(tǒng)的破壁方法在技術(shù)可行性或者在經(jīng)濟(jì)性上存在不足,距離大規(guī)模生產(chǎn)的需求尚有一定距離。高壓細(xì)胞破壁技術(shù),屬于微藻生物技術(shù)領(lǐng)域,涉及富含生物活性物質(zhì)的微藻細(xì)胞破壁方法,是采用濕法微藻細(xì)胞破壁技術(shù),有效保護(hù)微藻生物活性成分,降低其被氧化分解的相關(guān)技術(shù)。
應(yīng)用方案
經(jīng)過(guò)降溫預(yù)處理微藻物料通過(guò)柱塞作用進(jìn)入均質(zhì)腔體,被柱塞壓縮的微藻物料內(nèi)積聚了極高的能量,當(dāng)物料通過(guò)窄縫后瞬間失壓,造成內(nèi)部高能釋放引起空穴爆炸而強(qiáng)烈膨脹,產(chǎn)生空穴效應(yīng),致使物料強(qiáng)烈粉碎細(xì)化。同時(shí),瞬間失壓的微藻物料以極高的流速快速噴出,撞擊在用特殊材料制成的質(zhì)地堅(jiān)硬的撞擊環(huán)上,產(chǎn)生強(qiáng)大的沖撞力,造成物料粉碎。另外,碰撞前后的微藻物料隨液體高速運(yùn)動(dòng),通過(guò)泵腔內(nèi)通道和閥口狹縫時(shí)會(huì)產(chǎn)生巨大的剪切力。在撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)和空穴效應(yīng)聯(lián)合作用下濕物料微藻的細(xì)胞壁在瞬間(1~2秒內(nèi))就完成了細(xì)胞破碎,物料粒度幾乎全部細(xì)化到1 ~ 2μm以下的粒徑的微米材料。其中,50%左右的粒度直徑在100nm~1.0μm亞微米材料,而有30%~ 40%的粒徑大小為100nm以下的納米材料。
解決方案
首先富集菌體,收集胞內(nèi)產(chǎn)物的細(xì)胞或菌體。然后進(jìn)行細(xì)胞重懸,用適當(dāng)?shù)木彌_液或培養(yǎng)液將離心或沉降等方法得到的固體(沉淀、細(xì)胞、活性物質(zhì)等等)重新懸浮。其次進(jìn)行細(xì)胞破碎,使產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到液相中。最后收集含生化物質(zhì)的液相,進(jìn)行碎片分離,分離除去細(xì)胞、菌體、細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物,得到上清液或?yàn)V液。然后從澄清的濾液中提取胞內(nèi)產(chǎn)物,從細(xì)胞裂解物中獲取目標(biāo)產(chǎn)物。
PhD優(yōu)勢(shì)
微藻細(xì)胞破壁方法克服了傳統(tǒng)粉碎技術(shù)細(xì)胞破壁效率低下以及生物活性成分損失嚴(yán)重的技術(shù)屏障,微藻破壁粉碎過(guò)程主要利用細(xì)胞之間的高速碰撞,無(wú)異物混入,可以獲得高純度的微藻細(xì)胞破壁的微細(xì)顆粒。微藻破壁粉碎過(guò)程設(shè)備全封閉運(yùn)行,不污染環(huán)境,符合環(huán)保要求。微藻細(xì)胞破壁方法其特征在于細(xì)胞破壁過(guò)程在黑暗條件下完成,破碎細(xì)胞在工作腔內(nèi)進(jìn)行,工作腔及相關(guān)循環(huán)管道,設(shè)備材料采用避光、耐壓和不易不產(chǎn)生雜質(zhì)的不銹鋼,高壓細(xì)胞破壁適合于大規(guī)模生產(chǎn),破碎效率高。
◆破壁能力:高壓設(shè)計(jì),輕松上壓;均質(zhì)效率高,工藝穩(wěn)定;穩(wěn)定的破碎能力,更高的胞內(nèi)物提取;純機(jī)械破碎,無(wú)化學(xué)污染;可放大工業(yè)化生產(chǎn)工藝設(shè)備
◆控溫效果:獨(dú)特溫控設(shè)計(jì),內(nèi)置和外置雙向控溫,確保均質(zhì)過(guò)程及出料溫度可控。
◆活性保障:循環(huán)的控溫系統(tǒng),蛋白活性不失活,細(xì)胞破碎后,活性保值高達(dá)99%
◆無(wú)菌保障:金屬結(jié)構(gòu)連接,沒(méi)有O型圈或墊片,無(wú)死角設(shè)計(jì);在線排空結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì);所有機(jī)型均可實(shí)現(xiàn)在線清洗(CIP)、循環(huán)清洗、拆裝清洗、在位滅菌(SIP)
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