文章導讀 細胞破碎技術是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。
技術詳情

PhD低溫細胞破碎儀

PhD低溫細胞破碎儀的原理

       由電源(220V/380V, 60/50 Hz) 驅動PhD高壓均質機的泵柱塞做往復運動,物料在柱塞作用下,進入可調節壓力大小的閥組中,經過特定寬度的限流縫隙(均質區),瞬間失壓的物料以極高的流速(1000-1500米/秒)噴出,在均質閥內產生至少三種效應:空穴效應、撞擊效應、剪切效應。經過這多種力學效應相互作用處理過后,細胞破碎率大于99%。


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生物類適用案例

       酶工程、人用疫苗、獸用疫苗、HPV疫苗、融合蛋白、核酸、胰島素、試劑、抗體等。

       眾多的生物制品廠、藥廠、高校、科研院研究所,將大腸桿菌、酵母菌,或海洋澡類細胞等,放入PhD高壓均質機,加壓至1500-2000bar,將細胞壁進行破壁,提取細胞內的蛋白、酶類等有效成份,制成疫苗、試劑、抗體等,已帶來可觀的收益。

細胞破碎(cellrupture)技術

       指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術。細胞破碎技術是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。隨著重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。

高壓均質破碎法(homogenization)

       在歐美、中國、日本、韓國等多個國家,高壓均質機是常用的細胞破碎設備。美國PhD高壓均質機,其結構由電機驅動泵體,進而在均質閥體內生成壓力。細胞漿液通過止回閥進入均質閥體內,在高壓下迫使其在均質閥的小孔中高速沖出,且由于瞬間減壓和高速沖擊,使細胞同時受到高的液相剪切效用、空穴效用、撞擊效用而破碎。在操作方式上,可以采用單次通過高壓均質機或多次循環通過等方式,也可連續操作。為了控制溫度的升高,PhD同時采用內置式冷卻和外部冷卻的方式,使出料最低溫度能控制在0-10℃左右。在工業規模的細胞破碎中,對于大腸桿菌,用美國PhD高壓均質機,在15,000psi(1,035bar),均質一次即可達用用戶要求;對于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長靜止期的細胞,常采用均質壓力在25,000psi(1,720bar)的情況下均質。


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1、適用案例:酶工程人用疫苗,獸用疫苗,HPV疫苗,融合蛋白,核酸,胰島素,試劑,抗體等

2、表達載體:大腸桿菌,酵母菌,動物細胞,結核桿菌,芽孢桿菌,嗜熱桿菌等

3、一般工藝流程為:通過菌種轉基因的方式表達蛋白或核酸等物質,經過破碎細胞壁,離心純化的手段得到最終的產品,DNA轉接→菌種培養→獲得濕菌體→緩沖液重懸→破碎細胞壁→離心→純化

4、溫度控制:-10-30℃冷媒介質+PhD控溫均質閥+無菌換熱器

5、溫度范圍:-5-70℃ (通常控溫在4-10℃內)

6、材質:SS316L衛生級不銹鋼,無菌接口設計,直管式換熱器無死角

7、破碎壓力 :PhD高壓均質機從實驗型均質機到生產型設備,最大壓力均可達2750bar,適用大部分生物學菌體的破碎,適合研發→生產的同步放大。

細胞破碎效果圖:

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